如何 - 在家中從胎盤中分離羊膜幹細胞 - 💡 Fix My Ideas

如何 - 在家中從胎盤中分離羊膜幹細胞

如何 - 在家中從胎盤中分離羊膜幹細胞


作者: Ethan Holmes, 2019

Attila在家裡寫了一篇關於從胎盤分離羊膜幹細胞的方法 - 這應該產生很多對話......檢查出來,完整的步驟並討論!

“胎盤是一種非常有價值的人體組織,雖然它的適當回收不是放置食慾,而是將乾細胞從其羊膜層中分離出來,然後將它們儲存起來用於整個家庭的後續再生目的。來自胎盤的人羊膜上皮細胞(HAEC)是人胚胎幹細胞的替代替代物,並且具有在體外分化成所有三個胚層的潛力。這些細胞非常接近早期和廣泛多能的羊水來源的干細胞,最近在網上引起了很大的關注,由De Coppi,Atala等人發表。在自然生物技術。在這裡,我想表明,雖然我沒有提供任何保證,也不能給予任何保證,但從胎盤中分離幹細胞並不比製作牛排困難,並且在準備,投資和計時方面你甚至可以做到這一點。在家或在租金實驗室。這個過程在道德上沒有爭議,因為胎盤通常在出生後丟棄。今天,幹細胞療法只是一種很有前途的可能性,但在不久的將來,自我意識的公民可以管理自己的干細胞,在車庫裡種植它們,然後將它們存放在冰箱裡。如果是這樣,它可能是一種自主醫療自我保險。我們正處於開源科學支持的生物運動的曙光之中,為人民服務。使用Make Backyard Biology問題,因為它發明了bioDIY或家庭或車庫生物技術的基本語言。以下是卡通片中的算法,下面是詳細的,但不是自我包含的文本協議。如果被問到,將在稍後提供更多細節。“

跳轉後的其餘圖像和信息......鏈接到全尺寸圖像 - 這裡。

1. Googlise人羊膜幹細胞和乾細胞治療的潛力。這不是事實,而是有希望的可能性。

2.諮詢一些專家關於整個領域(如果你是自信的話,你可以跳過這一步)。

3.在出生前幾個月與懷孕的家庭成員(或您的熟人)交談,並說服她將羊膜細胞儲存在家中。

4.出生前幾個月諮詢她的婦科醫生,並說服他將出生時的胎盤放入裝滿冰塊的無菌燒瓶中。為了不育,你可以用一些抗生素(青黴素 - 鏈黴素)將它加入磷酸鹽緩衝鹽水溶液(PBS,這裡的製備)中。

5.技術準備(我沒有計算確切的金額,這是冒險所需要的,但它大約是數千美元,這可能比通過商業方式收集細胞便宜):設置無菌罩在你的車庫。您可以在家用空氣淨化器中製作一個,參見Philip Ross的Home Mycology Lab,在Make Backyard Biology問題,第102頁。租用或購買普通光學顯微鏡(10倍分辨率就足夠了),離心機(1000rpm) ,買一個液氮冰箱。

6.當胎盤在手中時,請在4小時內處理。使用無菌手套。

7.將帶有胎盤的燒瓶放在無菌罩下。取一個無菌剪刀,小心地切掉外面的上皮層。你切的越多,你獲得的干細胞就越多。將羊膜層從絨毛膜上機械剝離。

8.將磷酸鹽緩衝鹽水溶液(PBS,此處製備)中的羊膜洗滌數次(8-10次)以除去血液。

9.用無菌剪刀徹底擦拭組織。

10.要釋放羊膜上皮細胞,將切碎的羊膜與胰蛋白酶(0.05%)在37°C下孵育10分鐘。 10分鐘後從胰蛋白酶中取出消化的組織,並從消化中丟棄細胞以排除碎片。有不同種類的胰蛋白酶消化方案,我在這裡遵循Miki等人。

11.在另一管胰蛋白酶(0.05%)中將剩餘組織在37°C下處理20分鐘(如果需要,再次執行此步驟以收集更多細胞)。

12.從第二(和第三個20分鐘)消化物中匯集細胞。

13.通過100μm細胞過濾器傳遞細胞懸液。

14.在室溫下以1200RPM(150-200g)將過濾的細胞懸浮液固化8分鐘。

15.用PBS洗滌細胞沉澱並再次使用。

16.用血細胞計數器計數細胞,建議通過排除台盼藍染料來確定細胞的活力,這是基於活細胞具有排除某些染料的完整細胞膜的原理,例如台盼藍,而死細胞沒有。從一個上皮細胞中,您可以獲得多達1000萬至6000萬個乾細胞。

17.準備冷凍培養基。冷凍方案來自最佳實驗室手冊,Kathy Barker的實驗室導航儀:1ml /等分試樣加10%。冷凍培養基通常含有常規培養基,10-20%血清和5-10%甘油或DMSO。

18.每個安瓿將在1ml培養基中取1×10(7)個細胞(或4×10(6)和2×10(7)個細胞之間)。

19.通過輕輕移液將沉澱重懸於冷凍培養基中。

20.為了逐漸冷凍細胞,安全地將安瓿放在-60°C或更低的溫度下,並在那裡放置16-24小時。

21.將等分試樣與細胞一起放入液氮中並儲存。正如查爾斯普拉特在低溫生命和死亡中所說的那樣(第56頁):“液氮在大多數城市地區都可用(尋找”液態氣體“),而且通常價格低廉。它是無毒的,但必須小心處理,因為它的溫度為-196°C會對任何暴露的人體組織造成嚴重傷害。始終戴著厚重的手套和護目鏡。“

22.在X年後需要修復時,將凍結的細胞交給醫生。

好:冷凍



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